智能微生物限度儀是一種集自動化、智能化與高精度于一體的現(xiàn)代微生物檢測設(shè)備,廣泛應(yīng)用于藥品、食品、化妝品、醫(yī)療器械及水質(zhì)等行業(yè)的微生物限度檢查。通常由主機控制系統(tǒng)、無菌操作平臺、自動移液系統(tǒng)、恒溫培養(yǎng)單元及智能圖像分析軟件組成。用戶只需將樣品放入指定位置,設(shè)定檢測參數(shù),儀器即可自動完成從樣品處理到結(jié)果判定的全過程。其內(nèi)置的AI算法可對菌落形態(tài)進行智能識別與計數(shù),有效避免主觀判斷偏差。
智能微生物限度儀的操作步驟可歸納為以下清晰流程,結(jié)合儀器特性與實驗規(guī)范整理如下:
一、實驗前準(zhǔn)備
環(huán)境與人員消毒
在潔凈工作臺或無菌室(C級)操作,提前30分鐘開啟紫外燈/臭氧消毒環(huán)境。
操作人員穿戴無菌服、口罩、手套,用75%乙醇棉球消毒雙手及臺面。
儀器檢查與校準(zhǔn)
檢查真空泵、濾杯、管路密封性,確保無漏氣。
根據(jù)樣品性質(zhì)選擇濾膜:
孔徑:0.45μm(常規(guī)檢測)或1.0μm(含顆粒樣品)。
材質(zhì):混合纖維素酯(需無菌包裝)。
校準(zhǔn)儀器參數(shù)(如壓力、溫度、時間),確保符合檢測標(biāo)準(zhǔn)。
樣品與試劑準(zhǔn)備
樣品處理:
固體樣品(如口罩):稱取10g剪碎,加入200ml滅菌生理鹽水,用拍打儀混勻。
含顆粒樣品:過濾或離心去除懸浮物,防止堵塞濾膜。
試劑準(zhǔn)備:
無菌生理鹽水、培養(yǎng)基(如TSA瓊脂用于細菌,沙氏瓊脂用于真菌)、中和劑(如需)。
二、儀器組裝與滅菌
濾膜安裝
用火焰噴槍快速灼燒底座與濾杯接口滅菌。
無菌鑷子夾取濾膜(光面朝上),平鋪于底座濾網(wǎng)上,扣緊濾杯。
管路連接
硅膠管一端套在過濾裝置出液口,另一端套在收集瓶進液口。
另一根硅膠管一端套在收集瓶抽氣端,另一端通過不銹鋼寶塔接頭連接真空泵。
三、樣品過濾與集菌
倒入樣品
將處理后的樣品倒入濾杯,液面不超過最大刻度,避免溢出。
開啟真空泵,控制負壓20–30kPa,緩慢抽濾。
沖洗濾膜
過濾完成后,用50–100ml滅菌生理鹽水沖洗濾膜3次,去除殘留抑菌成分。
若樣品含強抑菌物質(zhì),需增加沖洗體積至200–300ml,并在培養(yǎng)基中加入中和劑。
四、濾膜轉(zhuǎn)移與培養(yǎng)
取出濾膜
關(guān)閉泵閥,用無菌鑷子取出濾膜,菌面朝上平貼于培養(yǎng)基表面,確保無氣泡。
培養(yǎng)條件
細菌培養(yǎng):TSA瓊脂,30–35℃培養(yǎng)3–5天。
真菌培養(yǎng):沙氏瓊脂,20–25℃培養(yǎng)5–7天。
逐日觀察并記錄菌落生長情況。
五、實驗后處理
儀器清潔
濾杯、濾網(wǎng)等部件拆卸后,用洗滌劑浸泡沖洗,75%乙醇擦拭。
真空泵定期更換潤滑油,防止污染。
儀器保存
斷電后,濾杯干燥保存,整機覆蓋防塵罩。
長期停用前,用乙醇沖洗管路。
數(shù)據(jù)記錄
完整記錄樣品信息、過濾參數(shù)、培養(yǎng)結(jié)果等。
每月用標(biāo)準(zhǔn)菌株(如大腸埃希菌ATCC 25922)驗證過濾效率及計數(shù)準(zhǔn)確性。
